HPV-18 E7蛋白通过SIRT1对宫颈癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响

该研究旨在探究HPV-18 E7蛋白通过SIRT1在HPV感染的宫颈癌细胞增殖、凋亡、自 噬中的作用。利用HPV-18 E7靶向小干扰RNA(E7-siRNA)抑制HPV-18 E7的表达, CCK-8法检测细 胞增殖情况, 流式细胞仪测定细胞凋亡情况, Western blot检测细胞自噬相关蛋白Beclin1和LC3表达 水平, qRT-PCR和Western blot分别检测SIRT1的mRNA和蛋白表达水平。利用表达载体在HaCaT细 胞表达HPV-18 E7蛋白, 再分别通过qRT-PCR和Western blot检测SIRT1的mRNA和蛋白表达水平。 最后, 利用SIRT1激动剂(SRT1720)预处理细胞, CCK-8法检测细胞增殖情况, 流式细胞仪测定细胞 凋亡情况, Western blot检测细胞自噬相关蛋白Beclin1和LC3表达水平。结果发现, E7-siRNA沉默 HPV-18 E7的表达后, 细胞增殖和自噬显著减弱, 凋亡水平升高, SIRT1的mRNA和蛋白表达水平显 著降低。在HaCaT细胞表达HPV-18 E7蛋白后, 发现HPV-18 E7可促进SIRT1的表达。SIRT1激动 剂处理可以促进HPV-18 E7基因沉默导致的低水平细胞增殖, 缓解HPV-18 E7基因沉默导致的细胞 凋亡, 提高自噬相关蛋白Beclin1表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值。总之, HPV-18 E7可以促进HeLa细胞 SIRT1的表达, 并通过SIRT1进而促进细胞的增殖和自噬, 抑制细胞凋亡。