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hsa-miR-378对人牙髓干细胞向成牙本质分化的影响与机制探讨


马秀花 晁晓芹 涂子锋 韩强 周洁 姚毅章*

(青海省第五人民医院口腔科, 西宁 810000)
摘要 :

该文旨在探讨人微小核糖核酸-378(hsa-miR-378)通过靶向骨形态发生蛋白-2(BMP-2)/ SMAD1信号通路影响人牙髓干细胞向成牙本质分化的作用。自牙髓组织分离并培养人牙髓干 细胞, 转染携带阴性对照(NC)、hsa-miR-378抑制剂(hsa-miR-378 inhibitor)、hsa-miR-378模拟 物(hsa-miR-378 mimics)的慢病毒载体, 分别记为NC组、hsa-miR-378 inhibitor组、hsa-miR-378 mimics组, 另取未处理细胞记为Blank组(仅添加等量无菌生理盐水)。间充质干细胞分子标记物 STRO-1、CD105、CD90阳性表达率高, 造血干细胞分子标记物CD34、CD45阳性表达率低; NC 组、hsa-miR-378 inhibitor组和hsa-miR-378 mimics组细胞的转染效率高; 与Blank组和NC组相比, hsa-miR-378 mimics组细胞碱性磷酸酶(ALP)染色变浅, ALP活性和细胞吸光度值降低(P<0.01), 矿 化结节数目明显减少, hsa-miR-378 inhibitor组细胞ALP染色加深, ALP活性和细胞吸光度值上升 (P<0.01), 矿化结节数目明显增多; 与Blank组和NC组比, hsa-miR-378 mimics组细胞hsa-miR-378表 达上升(P<0.01), BMP-2、SMAD1、牙本质基质蛋白1(DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素 (OCN) mRNA和蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01), hsa-miR-378 inhibitor组细胞hsa-miR-378表达下 降(P<0.01), BMP-2、SMAD1、DMP-1、DSPP、OCN mRNA和蛋白表达上升(P<0.05或P<0.01); hsa-miR-378可介导BMP-2表达。miR-378低表达可促进牙髓干细胞向成牙本质分化, 这可能与靶 向激活BMP-2/SMAD1信号通路相关。