OPN通过VEGF途径增强脑卒中后的神经可塑性

该研究旨在探讨骨桥蛋白(osteopontin, OPN)对缺血性脑卒中亚急性期的神经可塑性 作用。制备小鼠光化学栓塞模型, 在卒中后2、7、14、21、28天采用Western blot测定小鼠大脑皮 层梗死周区组织中突触素(synaptophysin, SYN)的蛋白表达水平。卒中后第7天, 通过脑立体定位 仪局部给予人重组骨桥蛋白(recombinant osteopontin, rOPN)。运用囊泡谷氨酸转运体1(vesicular glutamate transporter 1, VgluT 1)、突触后致密蛋白95(post-synaptic density protein 95, PSD 95)免疫 荧光染色, 观察骨桥蛋白治疗后梗死周区皮层共存突触的数量。采用胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)、离子化钙结合适配器分子1(ionized calcium-binding adapter molecule 1, IBA1)、血小板内皮黏附分子31(platelet endothelial cell adhesion molecule-1, CD31)染色评估骨桥 蛋白对胶质增生及血管密度的作用。此外, 通过转录组测序分析OPN调控神经可塑性的潜在机制。 以上结果提示, 与假手术组相比, 卒中后第7天梗死周区的突触素蛋白表达水平显著上调, 差异具有 统计学意义(P<0.01)。与生理盐水组相比, OPN显著增强梗死周区皮层神经可塑性, 促进血管生成 和胶质细胞增生(P<0.01)。转录组测序结果提示, OPN诱导血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF) mRNA表达。Western blot结果进一步证实OPN显著上调梗死周区VEGF蛋白 的表达(P<0.01)。总之, 结果表明, 卒中亚急性期, OPN可能通过VEGF激活梗死周区的突触相关蛋 白, 调节神经可塑性, 促进血管生成和胶质细胞增生, 继而起到神经修复作用。因此, OPN可能作为 一种促进脑卒中后神经修复的治疗性蛋白。