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辛酸钠对骨骼肌细胞缺糖缺氧/再灌注损伤的保护作用


刘少云# 蒋相康# 徐杰丰 何露 张茂*

(浙江大学医学院附属第二医院急诊医学科, 浙江省急危重症临床医学研究中心, 浙江省严重创伤与烧伤诊治重点实验室, 杭州 310009)
摘要 :

该研究探索了辛酸钠对骨骼肌细胞缺糖缺氧/再灌注(OGD/Rep)损伤的保护作用。利用 锥虫蓝染色法测定6种不同浓度的辛酸钠培养液对正常培养骨骼肌细胞24 h存活率的影响。随后采用 缺糖缺氧后复糖复氧的方法构建骨骼肌细胞OGD/Rep损伤模型, 将细胞随机分为对照组、OGD/Rep组、 0.25 mmol/L辛酸钠组和0.50 mmol/L辛酸钠组。CCK8法测定各组细胞活性, 检测各组细胞中乳酸脱氢 酶(LDH)、超氧化物(·O2 – )以及超氧化物歧化酶(SOD)水平; JC-1荧光探针测定各组细胞线粒体膜电位 水平; TUNEL染色法检测各组细胞凋亡数目, Western blot测定各组细胞Bax、Bcl-2、Mfn-2、Drp-1蛋白 表达水平。结果表明, 6种浓度辛酸钠处理组中, 0.25 mmol/L辛酸钠组、0.50 mmol/L辛酸钠组与对照组 细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比, OGD/Rep组细胞活性降低, 细胞LDH水平升高, 细胞中·O2 – 产生量增加, SOD活性降低, 线粒体膜电位降低以及细胞凋亡数目增多(P<0.05)。与OGD/ Rep组相比, 0.25 mmol/L辛酸钠组、0.50 mmol/L辛酸钠组细胞活性均增强, 细胞LDH水平下降(P<0.05); 0.25 mmol/L辛酸钠组·O2 – 水平有下降趋势, 但差异无统计学意义(P>0.05); 0.25 mmol/L辛酸钠组SOD活 性增强(P<0.05)。0.25 mmol/L和0.50 mmol/L辛酸钠组与OGD/Rep组相比线粒体膜电位增加, 细胞凋亡 数目减少。与对照组相比, OGD/Rep组Bcl-2/Bax蛋白值降低, Drp-1和Mfn-2蛋白表达量降低; 而与OGD/ Rep组相比, 0.25 mmol/L、0.50 mmol/L辛酸钠组Bcl-2/Bax蛋白值升高, Drp-1和Mfn-2蛋白表达量增加。 研究表明, 早期应用辛酸钠可减轻OGD/Rep引起的骨骼肌细胞损伤, 抑制细胞的过氧化状态并减少细 胞凋亡, 其机制可能与辛酸钠调节线粒体结构动态平衡相关。