离心参数对流式分选后样本的影响研究

流式分选术是对细胞或生物颗粒进行无菌筛分的技术, 因具有检测速度快、通量高、灵敏度高等优势, 故在医学及生命科学领域有广阔的应用前景。离心是流式分选后富集细胞的常用技术, 直接影响流式分选后样本的细胞活性和得率。该文以KPC细胞系(即小鼠胰腺组织特异性kras缺失p53突变形成胰腺癌分离的癌细胞, 简称KPC)和小鼠原代脾脏细胞为例, 利用FACS SORP Aria II分选仪进行分选。对离心力、离心时间等参数进行优化, 结果表明KPC细胞分选后, 300 ×g、4 °C离心25 min, 能获得高得率高活性的细胞用于下游实验, 而小鼠原代脾脏细胞则300 ×g、4 °C离心15 min最为合适。该方法解决了流式分选后细胞离心难、离心损失大的问题, 可提高分选实验实际得率, 为流式分选术的应用提供技术参考。