抗癌生物活性肽对与肿瘤相关成纤维细胞共培养的食管癌细胞的增殖影响

梁亚冰¹ 杨凌¹ 张满² 苏秀兰¹*

(¹内蒙古医科大学附属医院临床医学研究中心, 内蒙古医学细胞生物学重点实验室, 呼和浩特 010050;²内蒙古医科大学附属医院胸外科, 呼和浩特 010050)

摘要 :

该研究旨在探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖的影响及抗癌生物活性肽(ACBP)对增殖的干预作用和可能的作用机制。收集5例手术切除患者的食管癌组织, 分离培养得到ESCC CAFs并进行特征指标鉴定; 建立CAFs与ESCC细胞共培养体系, CFSE染色和流式细胞术检测细胞增殖; 收集CAF-1的条件培养基, 加入ACBP进行联合培养KYSE140细胞, IncuCyte检测细胞增殖; qRT-PCR和Western blot检测Hedgehog信号通路相关基因的表达水平。该研究成功分离CAFs, Western blot结果显示CAFs均表达波形蛋白(Vimentin)及纤维连接蛋白(Fibronectin), 不表达E-钙黏蛋白(E-cadherin); 相比于单独培养, 与CAF-1共培养的KYSE140细胞的CFSE水平降低, 细胞融合率增加(P<0.05), 细胞中的GLI1和PTCH1的mRNA和蛋白水平升高(P<0.05); 相比于条件培养基组, ACBP加入可以使KYSE140细胞的融合率下降(P<0.05); 相较于单独培养, ACBP加入后KYSE140细胞的GLI1和PTCH1的mRNA和蛋白水平显著下降(P<0.05)。该研究表明, CAFs可以通过激活Hedgehog信号通路促进食管癌细胞增殖, ACBP可在与CAFs共培养条件下通过抑制Hedgehog信号通路抑制食管癌细胞的生长。