携带线粒体tRNAThr 15943T>C协同12S rRNA 1555A>G突变的非综合征性耳聋致病机理的初步研究

卫梦倩^1,2 唐霄雯^1,2 高应龙^1,2 管敏鑫^1,2*

(¹温州医科大学检验医学院生命科学学院, 温州 325035; ²温州医科大学Attardi线粒体生物医学研究院, 温州 325035)

摘要 :

该研究通过构建携带线粒体tRNA^Thr 15943T>C协同12S rRNA 1555A>G突变(双突变组)的永生化淋巴母细胞系, 同时建立仅含12S rRNA 1555A>G突变(单突变组)和正常对照组永生化淋巴母细胞系, 探究线粒体tRNA^Thr 15943T>C协同12S rRNA 1555A>G突变与耳聋发病的关系, 以了解线粒体突变致聋的分子机制。对该家系的临床资料进行分析的结果表明, 当包括使用氨基糖苷类抗生素(aminoglycoside antibiotic, AmAn)的药物性耳聋家系成员时, 此家系耳聋外显率为26%; 当排除用药的耳聋成员时, 此家系耳聋外显率是10%; 相比之下, 已报道的14个m.1555A>G的耳聋家系的平均外显率在用药和未用药的情况下分别仅为13%和6%。利用Northern blot和Western blot分别检测三组细胞中线粒体tRNA和多肽的表达量, 结果表明相比于正常对照组, tRNAThr在双突变组中的表达量显著降低, 而在单突变组中的表达量无显著变化, tRNA^Trp、tRNA^Ala 、tRNA^Tyr 、tRNA^Cys和tRNA^Pro的稳态水平在三组细胞中没有显著性差异; CO2、CO3和A6在双突变组中的表达量显著降低, 而在单突变组中的表达量无显著性差异; 其他蛋白多肽在三组细胞中的表达量没有显著差异, 说明m.15943T>C突变降低了tRNA^Thr的稳态水平, 致使线粒体部分多肽表达水平下降, 从而影响了线粒体呼吸链复合体的功能和稳定性进而导致了线粒体代谢障碍, 提示线粒体tRNAThr 15943T>C可能与m.1555A>G突变引起的耳聋相关。