葡萄糖、棕榈酸通过ROCK1-KIF2A通路诱导结肠癌细胞中心体扩增

王朴^1* 杜斌² 牛紫旭³ 周飞伦³ 李少钦⁴

(¹长治医学院, 基础医学部, 生物教研室, 长治 046000; ²长治医学院, 基础医学部, 寄生虫教研室, 长治 046000; ³长治医学院, 第二临床学院, 长治 046000; ⁴江苏师范大学, 生命科学学院, 徐州 211006)

摘要 :

为了研究微管解聚酶KIF2A如何参与葡萄糖、棕榈酸诱导的结肠癌HCT116细胞中心体扩增, 该实验使用葡萄糖(Glu, 25 mmol/L)、棕榈酸(Pal, 150 μmol/L)处理HCT116细胞后, 再使用ROCK1抗体免疫沉淀其相互作用蛋白, 并将沉淀结果通过高通量质谱HPLC/MS鉴定。通过Westernblot、siRNA、免疫荧光验证ROCK1的相互作用蛋白。结果显示, 在葡萄糖、棕榈酸共同处理后, 中心体定位的ROCK1可结合中心体蛋白定位的微管解聚酶KIF2A。敲降KIF2A的表达可降低葡萄糖、棕榈酸诱导的中心体扩增率。生物信息学分析显示, 癌组织KIF2A的mRNA表达水平较健康组织显著增加(健康组织3.275±0.385, Stage I 4.460±0.682, Stage II 4.436±0.620, Stage III 4.365±0.680, Stage IV 4.442±0.555, P<0.01), 不同临床分期的结肠癌组织中KIF2A的表达量无显著差异。KIF2A的低表达与结肠癌的不良预后呈正相关(中位生存期为低表达1 765天vs高表达3 042天)。综上所述,ROCK1-KIF2A通路在葡萄糖、棕榈酸诱导的中心体扩增中起到了关键作用, 为糖尿病相关的结肠癌综合防治提供了实验依据。