circ_0015756通过调控miR-515-5p/HMGB3轴影响肺癌细胞增殖、凋亡和迁移

为探讨环状RNA 0015756(circ_0015756)对肺癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响和潜在机制, 该研究采用实时定量PCR(RT-qPCR)分析肺癌组织和癌旁组织中circ_0015756和微小RNA(miR)-515-5p的表达水平。同时, 将circ_0015756小干扰RNA(si-circ_0015756)、miR-515-5p模拟物、si-circ_0015756+miR-515-5p抑制物分别转染肺癌细胞A549, 采用四甲基偶氮唑蓝实验、平板克隆实验检测A549细胞的增殖能力, 采用流式细胞术分析A549细胞的凋亡率, 采用划痕愈合实验和Transwell实验检测A549细胞的迁移能力。蛋白质印迹法测定高迁移率族蛋白3(HMGB3)的表达水平。双荧光素酶分析circ_0015756与miR-515-5p、miR-515-5p与HMGB3的靶向关系。结果显示, 肺癌组织中circ_0015756的相对水平显著高于癌旁组织(P<0.05), miR-515-5p的相对水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。干扰circ_0015756表达后A549细胞增殖抑制率、凋亡率、miR-515-5p的相对水平显著升高(P<0.05), 集落形成数、迁移距离、迁移细胞数、HMGB3蛋白的相对水平显著降低(P<0.05)。过表达miR-515-5p后A549细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高(P<0.05), 集落形成数、迁移距离、迁移细胞数、HMGB3蛋白的相对水平显著降低(P<0.05)。抑制miR-515-5p表达明显减弱干扰circ_0015756表达对A549细胞增殖、集落形成、迁移以及HMGB3蛋白表达的影响(P<0.05)。circ_0015756与miR-515-5p直接结合, miR-515-5p与HMGB3直接结合。总之, 干扰circ_0015756通过靶向上调miR-515-5p/HMGB3轴抑制肺癌细胞增殖和迁移, 诱导细胞凋亡。