人参皂苷Rg1拮抗D-半乳糖致睾丸间质细胞雄激素分泌障碍的机制研究

向叶舟^1,2 汪子铃¹ 肖含先之¹ 侯吉颖¹ 向¹ 姜蓉¹ 王璐¹ 黄国宁² 王亚平¹*

(¹重庆医科大学, 干细胞与组织工程研究室, 组织学与胚胎学教研室, 重庆 400016; ²重庆市妇幼保健院生殖与遗传研究所, 重庆 400013)

摘要 :

该文重点探讨人参皂苷Rg1拮抗D-半乳糖(D-gal)致小鼠睾丸间质细胞分泌雄激素障碍的机制。采用D-gal构建小鼠衰老模型, 体内注射Rg1干预衰老过程, 观察睾丸组织细胞衰老的病理学改变; 体外构建D-gal致睾丸间质细胞(TM3细胞株)衰老模型, 在培养体系加入Rg1拮抗D-gal的致衰老作用。衰老相关半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察小鼠睾丸组织细胞和体外培养TM3细胞的衰老情况; ELISA法检测TM3细胞分泌睾酮水平和细胞氧化应激损伤水平; 荧光探针DCFH-DA检测细胞活性氧(ROS)水平; Western blot检测TM3细胞合成睾酮的关键酶和Nrf2/ARE抗氧化通路相关蛋白表达; qRT-PCR法检测相关炎症因子及睾酮合成关键酶基因的mRNA表达。结果显示, 注射Rg1拮抗D-gal致小鼠衰老过程, 衰老的睾丸间质细胞数量明显减少。Rg1体外拮抗D-gal致TM3细胞衰老作用后, 细胞分泌睾酮水平无显著降低; IL-1、IL-6、IL-8等炎症因子的基因表达受到抑制; 细胞内GSH-Px和CAT表达活性提高同时细胞产生丙二醛(MDA)与活性氧(ROS)能力受到抑制;StAR、3β-HSD及P450scc等睾酮合成关键酶基因及蛋白表达上调; Nrf2、HO-1等抗氧化蛋白表达上调, Keap1蛋白表达下调。研究提示, Rg1可能通过激活Nrf2/ARE抗氧化信号通路, 拮抗D-gal对睾丸间质细胞的氧化应激损伤, 进而调控睾丸雄激素的分泌功能。