人胎盘底蜕膜间充质干细胞库的初步构建
肖桂清1 段训威2 唐燕程1 郑梦盈1 苏爱盟1 耿晓波1 刁勇3*
(1福建省银丰干细胞工程有限公司, 福州 350100; 2泉州师范学院, 泉州 362000; 3华侨大学医学院, 泉州 362021)
摘要 :
该文探讨了建立生物学特性稳定的人胎盘底蜕膜间充质干细胞(DB-MSCs)库的可行性, 旨在为组织工程种子细胞提供更多来源。该研究采用组织块贴壁法从10例足月人胎盘底蜕膜组织中获取间充质干细胞, 并采用STR检测细胞是否均来源于母体组织。对分离得到的DB-MSCs采用–196 °C低温冻存, 并在一定时间复苏培养, 用倒置显微镜观察细胞形态, CCK8法检测细胞增殖能力, 流式细胞仪分析细胞周期和细胞表面标志物, 特定培养基诱导其成脂、成骨、成软骨分化。结果显示, 从底蜕膜组织中分离培养扩增获得数目稳定的DB-MSCs。STR分析证明, 所得细胞均来源于母体组织, 经冻存并复苏后的DB-MSCs形态和表面标志物保持不变, 并可稳定扩增8代以上, 倍增时间为(2.04±0.25)天, 大多数的细胞处于静止期(G0/G1), 复苏后的细胞保持了较强的成脂、成骨和成软骨分化能力, 在细胞中未发现细菌、真菌、支原体和内毒素等的污染。该研究初步建立了DB-MSCs库, 进一步明确了库存细胞的制备流程及其质量评价体系, 可为再生医学修复重建组织工程提供较好的种子细胞。
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