长链非编码RNA IFNG-AS1靶向miR-19b-1-5p调控oxLDL诱导的血管内皮细胞增殖、凋亡的机制研究

为了探讨长链非编码RNA干扰素活化基因的反义核糖核酸(lncRNA IFNG-AS1)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的人脐静脉血管内皮细胞EVC-304增殖、凋亡的影响和调控机制, 该研究采用100 μg/mL的oxLDL分别处理转染si-IFNG-AS1、miR-19b-1-5p mimics或共转染si-IFNG-AS1与anti-miR-19b-1-5p的EVC-304细胞, 利用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中IFNG-AS1和miR-19b-1-5p表达, 细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖, 流式细胞术检测细胞凋亡, 蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)、多肿瘤抑制基因1(P16)、剪切的DNA修复酶(cleaved-PARP)、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-3(cleavedcaspase-3)的蛋白表达情况; 利用双荧光素酶报告基因实验验证IFNG-AS1和miR-19b-1-5p的靶向关系。结果显示, oxLDL促进了EVC-304细胞中IFNG-AS1的表达, 而抑制了miR-19b-1-5p的表达(P<0.05); 抑制IFNG-AS1或过表达miR-19b-1-5p提高了oxLDL处理的EVC-304细胞增殖活性及细胞中P21和P16蛋白表达, 而降低了细胞凋亡率及cleaved-PARP和cleaved-caspase-3的蛋白表达(P<0.05); 抑制miR-19b-1-5p逆转了抑制IFNG-AS1对oxLDL处理的EVC-304细胞增殖和凋亡的影响(P<0.05); 双荧光素酶报告基因实验证实IFNG-AS1靶向调控miR-19b-1-5p表达。这提示抑制IFNG-AS1表达可促进oxLDL处理的EVC-304细胞增殖, 并抑制细胞凋亡, 其作用机制与靶向上调miR-19b-1-5p表达有关, IFNG-AS1/miR-19b-1-5p轴可能为动脉粥样硬化的治疗提供新的靶点。