长链非编码RNA B3GALT5-AS1靶向miR-361-3p调节大鼠胰腺腺泡细胞增殖及凋亡的分子机制 

 探讨长链非编码RNA(lncRNA) 1,3-半乳糖基转移酶–多肽5反义RNA(B3GALT5-AS1) 对雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞AR42J增殖、凋亡的调控机制。用雨蛙素诱导AR42J细胞构 建急性胰腺炎细胞损伤模型; 用脂质体将pcDNA-B3GALT5-AS1组(转染pcDNA-B3GALT5-AS1)、 si-B3GALT5-AS1组(转染si-B3GALT5-AS1)、miR-361-3p组(转染miR-361-3p mimics)、anti-miR361-3p组(转染anti-miR-361-3p)、pcDNA-B3GALT5-AS1+miR-361-3p组(共转染pcDNA-B3GALT5AS1和miR-361-3p mimics)、si-B3GALT5-AS1+anti-miR-361-3p组(共转染si-B3GALT5-AS1和antimiR-361-3p)转染至AR42J细胞, 再用雨蛙素诱导细胞损伤。细胞计数试剂盒-8(cell counting kit8, CCK-8)、流式细胞术、酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测细胞增殖率, 细胞凋亡率和肿瘤坏 死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)含量; 免疫印迹(Western blot)、实时荧光定量逆转录聚合 酶链反应(qRT-PCR)分别检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、存活蛋白(survivin)、前体半胱 氨酸天冬氨酸蛋白酶3(procaspase-3)、前体半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(procaspase-9)蛋白水平及 B3GALT5-AS1、miR-361-3p的表达; 双荧光素酶报告实验检测B3GALT5-AS1与miR-361-3p的结合 力。与对照组相比, 雨蛙素诱导的AR42J细胞的增殖率显著降低, 凋亡率明显升高, TNF-α、IL-6的 含量显著升高(P<0.05)。模型细胞中B3GALT5-AS1表达异常降低, miR-361-3p表达异常升高, 且过 表达B3GALT5-AS1和抑制miR-361-3p可促进受损细胞的增殖, 抑制凋亡, 上调cyclin D1、survivin、 procaspase-3、procaspase-9蛋白表达水平; 并且抑制B3GALT5-AS1和过表达miR-361-3p可以抑制受 损细胞增殖，促进细胞凋亡, 下调cyclin D1、survivin、procaspase-3、procaspase-9蛋白表达水平。 B3GALT5-AS1能够结合miR-361-3p。miR-361-3p可恢复B3GALT5-AS1对受损细胞增殖、凋亡的 调节作用。lncRNA B3GALT5-AS1可促进雨蛙素诱导的AR42J细胞增殖, 抑制凋亡, 其机制与靶向 miR-361-3p有关。