过表达HepaCAM联合谷氨酰胺剥夺抑制前列腺癌细胞的增殖

何镇廷¹ 李婷¹ 范佳鑫¹ 袁鸿玲¹ 郑永波² 吴小候² 罗春丽*

(¹重庆医科大学检验医学院, 临床检验诊断学教育部重点实验室, 重庆 400016; ²重庆医科大学附属第一医院泌尿外科, 重庆 400016)

摘要 :

该研究旨在探讨过表达肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule, HepaCAM)联合谷氨酰胺(glutamine, Gln)剥夺对前列腺癌(prostae cancer, PCa)细胞谷氨酰胺代谢及增殖的影响。采用Ad-HepaCAM腺病毒感染前列腺癌细胞株PC3、LNCaP。克隆形成实验及MTT实验检测细胞的克隆形成率及增殖活性。qRT-PCR、Western blot分别检测PC3、LNCaP细胞中谷氨酰胺酶(glutaminase, GLS)、溶质载体家族I成员V(solute carrier family 1 member 5, SLC1A5)、MYC癌基因家族(可编码c-MYC蛋白分子)以及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)的表达情况。结果显示, 单独过表达HepaCAM与剥夺Gln均可抑制PC3、LNCaP细胞的增殖能力, 两者联用效果更佳。qRT-PCR和Western blot显示, 与对照组(+Gln组)相比,剥夺谷氨酰胺组(-Gln组)细胞中的GLS、SLC1A5、MYC表达呈应激抵抗式上调, 过表达HepaCAM后上述基因表达重新受到抑制。该实验证明, 过表达HepaCAM与Gln剥夺联用可更显著地抑制前列腺癌的增殖能力, 同时, 过表达HepaCAM可在一定程度上抑制前列腺癌细胞的谷氨酰胺代谢重编程。