一种改良的小鼠肝窦内皮细胞的分离、纯化、培养及鉴定方法
刘 彪1,2 傅童生1 唐 丽2* 贺福初2*
1湖南农业大学动物医学院, 长沙410128; 2军事医学科学院放射与辐射医学研究所, 北京蛋白质组研究中心, 蛋白质组学国家重点实验室, 北京102206
摘要 : 采用改进的胶原酶灌注方法结合Percoll密度梯度离心加anti-LSEC microbeads免疫磁珠分离纯化小鼠肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells， LSECs)， 台盼蓝染色测定细胞活力， 光镜下观察培养细胞的形态学变化， 流式细胞仪分析其纯度， RT-PCR方法检测其新的特征性分子LSECtin基因的表达。结果表明: 此方法分离的小鼠LSECs得率为(5±0.2)×106个/只小鼠， 台盼蓝染色活力≥95%， 流式细胞仪分析其纯度达到91.92%， 光镜下观察细胞形态典型， RT-PCR检测到新的特征分子LSECtin基因的表达。本研究建立了一种小鼠LSECs的分离、纯化、培养及鉴定方法， 为其功能和作用机制的深入研究打下了基础。
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