抗P-选择素凝集素-EGF功能域单抗对人树突状细胞成熟及功能抑制作用分析

摘要 : 在发现抗P-选择素凝集素-EGF功能域单抗(PsL-EGFmAb)对体外培养人树突状细胞(DC)成熟及功能有抑制作用基础上，进一步观察了PsL-EGFmAb对DC干预调节的作用机制。通过SCF、GM-CSF、TGF-β1、Flt-3L和TNF-α体外培养体系，从脐血CD34+造血干细胞中诱导扩增获得DC，并于成熟过程中用PsL-EGFmAb进行干预。采用流式细胞仪检测细胞表面分子表达；RT-PCR检测细胞内NF-κBp50、NF-κBp65 mRNA表达；MTT比色法检测T细胞增殖反应，以及ELISA法测定IL-12p70分泌的含量。结果显示，PsL-EGFmAb对DC表面特异性C型凝集素DC-SIGN (CD209)表达有抑制作用，同时也能抑制DC细胞内NF-κBp50、NF-κBp65 mRNA表达，相应抑制其黏附共刺激分子CD11c、CD83、CD80、CD86表达，以及IL-12p70分泌，此外也可抑制DC体外刺激T细胞增殖的能力。研究结果表明，PsL-EGFmAb对DC成熟及功能的抑制作用，提示与其抑制作为DC模式识别受体及功能分子DC-SIGN有关，并可能是通过影响NF-κB信号途径起作用。