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siRNA对乳腺癌细胞Cyclin E表达和生长抑制作用


蒋 磊 陈日曙1 李继承*
浙江大学细胞生物学研究所,杭州 310031;1乐清市第二人民医院,乐清 325608
摘要 : 研究siRNA对乳腺癌MCF-7细胞株cyclin E表达的抑制及对细胞生长的影响。化学合成针对cyclin E基因的小干扰RNA (siRNA),转染MCF-7细胞株;分别应用荧光定量PCR和免疫印迹测定cyclin E mRNA和蛋白质的表达,CCK-8测定细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期,软琼脂培养检测细胞克隆形成能力。10、50、100 nmol/L siRNA-cyclin E分别使MCF-7细胞cyclin E基因表达降低了24.7%、62.5%和71.0%,蛋白质表达降低了40.8%、66.5%和71.3%。转染siRNA-cyclin E后,G1期细胞增多,S期减少,增殖受到抑制,软琼脂克隆形成率降低。结果提示,在MCF-7细胞株中,导入针对cyclin E的siRNA,可有效抑制cyclin E的表达,进而使细胞增殖减缓,逆转其恶性表型。