Drp1抑制剂Mdivi-1对脂多糖/D-半乳糖胺诱导的急性肝损伤的影响及机制研究
肖丽丹 唐俐 杨永强 李龙江 黄佳 沈宜 张力*
重庆医科大学, 基础医学院病理生理学教研室, 重庆 400016
摘要 : 线粒体动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1, Drp1)是细胞凋亡调控的新靶点, 而凋亡是急性肝损伤的重要特征, 该研究采用选择性Drp1抑制剂Mdivi-1, 探讨了Drp1在急性肝损伤中的可能病理生理学作用及其潜在的药靶价值。该研究动物实验采用6~8周龄雄性BAlB/c小鼠, 在腹腔内注射脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)/D-半乳糖胺(D-galactosamine, D-Gal), 诱导急性肝损伤模型。实验分为四组: 正常对照组(A)、Mdivi-1单独处理组(B)、模型组(C)和Mdivi-1干预组(D)。Mdivi-1在LPS/D-Gal暴露前30 min经腹腔注入, 在LPS/D-Gal注射后1.5 h或6.0 h处死动物, 采集肝组织和血浆标本。实验通过组织病理学染色、比色法检测血浆转氨酶活性、细胞因子TNF-α检测、casepase-3、casepase-8和casepase-9的活性检测和TUNEL技术探讨Mdivi-1介导下肝损伤的改善情况。结果显示, 通过H&E染色观察肝组织病理学改变, 正常对照组和Mdivi-1单独处理组小鼠肝组织结构无异常, LPS/D-Gal暴露后可引起一系列显著的组织学异常改变, Mdivi-1干预组肝组织学异常明显减轻。通过检测血浆谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)活性评估肝脏功能损害程度, Mdivi-1干预组ALT和AST的活性明显降低(P<0.05)。采用ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)水平以评估炎症反应程度, Mdivi-1干预组的炎性细胞因子表达降低明显(P<0.05)。通过半胱氨酸蛋白酶-3(casepase-3)、半胱氨酸蛋白酶-8(casepase-8)、半胱氨酸蛋白酶-9(casepase-9)和TUNEL染色评估组织凋亡程度, Mdivi-1干预组的凋亡水平降低显著(P<0.05)。所以得出结论, Mdivi-1干预可减轻 LPS/D-Gal诱导的肝组织病变、降低血浆转氨酶、下调血浆中 TNF-α水平、降低肝内casepase-3、casepase-8和casepase -9活性并减少TUNEL阳性细胞的数量。以上数据表明, Drp1抑制剂Mdivi-1可减轻LPS/D-Gal诱导的急性肝损伤。
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