羽扇豆醇通过抑制RhoA-ROCK1信号通路抑制结肠癌细胞增殖
蒋亦雯 洪丹 楼哲丰 金龙金*
温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 温州 325000
摘要 :
该文探讨了羽扇豆醇(Lupeol)对人结肠癌HCT116和SW620细胞增殖的影响及相关作用机制。使用不同浓度的Lupeol处理HCT116和SW620细胞后, 用MTT法检测细胞活性, CCK8法检测细胞增殖能力, 平板克隆实验检测细胞克隆形成能力, 流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,(quantitative real-time PCR, qPCR)和Western blot检测相应mRNA和蛋白表达水平, 免疫荧光检测β-Catenin蛋白细胞内分布情况。通过构建shRNA敲低两种结肠癌细胞中RhoA, 进一步研究Lupeol影响细胞增殖的分子机制。结果显示, Lupeol处理后, HCT116和SW620细胞增殖能力明显下降,克隆形成能力受到抑制, 细胞周期阻滞于G0/G1期, 细胞内RhoA、ROCK1、β-Catenin、Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平均显著下降, β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。敲低RhoA后抑制了细胞增殖, 同时使得RhoA-ROCK1-β-Catenin信号通路蛋白受到抑制, β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。综上所述, Lupeol可通过抑制RhoA-ROCK1信号通路, 抑制β-Catenin蛋白表达, 进而抑制HCT116和SW620细胞增殖, Lupeol有望成为临床结肠癌治疗的新药物。
中文版
英文版