小鼠骨髓间充质干细胞通过miR-130b调控上皮钠通道的机制研究
张红蕾 周祉妤 候亚鹏 刘宏飞 王琳 丁炎 聂宏光*
中国医科大学基础医学院干细胞与再生医学研究室, 沈阳 110122
摘要 :
该研究旨在探讨小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)通过miR-130b对上皮钠通道(epithelial sodium channel, ENaC)的影响。将分离与培养的小鼠BMSCs接种到Transwell小室中, 然后与H441细胞进行共培养。利用CCK-8试剂盒检测BMSCs对H441细胞生存能力的影响; 采用Western blot技术检测BMSCs对共培养的H441细胞中γ-ENaC蛋白水平的影响; qRT-PCR技术检测与BMSCs共培养的H441细胞中miR-130b表达情况, 然后将此microRNA转染到普通培养的H441细胞中, 在蛋白水平进一步验证其对H441细胞中γ-ENaC的影响。实验结果表明, BMSCs能够增强H441细胞的生存能力; 同时BMSCs能分别增加共培养的H441细胞中γ-ENaC的蛋白水平以及miR-130b的转录水平; Western blot实验进一步证实, miR-130b转染至H441细胞后能够增加其γ-ENaC的蛋白表达。由此我们推测, BMSCs能够增强H441细胞的生存能力并且可能通过miR-130b发挥其对γ-ENaC的蛋白水平调控作用。
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