过表达FGD6对肝干细胞分化的调控作用

余师师¹ 沙鸥¹ 李宛玲¹ 胡倩¹ 何通川² 张秉强^1*

¹重庆医科大学附属第一医院消化内科, 重庆 400016; ²美国芝加哥大学医学中心分子肿瘤实验室, 芝加哥 600637

摘要 :

该文主要探讨过表达FGD6(faciogenital dysplasia 6)基因对肝干细胞分化的调控作用及其可能的机制。将FGD6基因插入腺病毒载体使其过表达, 并包装成腺病毒(Ad-FGD6), 感染小鼠胚胎肝干细胞HP14.5, 以空载体腺病毒(Ad-null组)和未感染腺病毒组(Blank control组)作为对照; 半定量 PCR和Western blot分别检测FGD6、肝干细胞标志物(AFP)、肝细胞标志物(ALB)、胆管上皮细胞标志物(CK19、SOX9)及Wnt经典通路中的标志物(β-catenin、wnt3a)的mRNA和蛋白表达水平; 并通过糖原染色法(PAS染色)检测细胞内糖原合成的变化情况; CCK8检测各组细胞增殖情况。结果显示, 感染 Ad-FGD6腺病毒后, 与Ad-null组及Blank control组相比, HP14.5细胞中的FGD6的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05), 肝干细胞标志物(AFP)及胆管上皮标志物(CK19、SOX9)的mRNA及蛋白的表达水平降低(P<0.05), 而肝细胞标志物ALB及Wnt经典通路中的标志物(β-catenin、wnt3a)的mRNA和蛋白的表达水平均升高(P<0.05); PAS染色发现, Ad-FGD6组存在紫红色颗粒, 呈阳性反应, 这说明有糖原合成。CCK8检测发现, Ad-FGD6组能促进肝干细胞增殖(P<0.05)。因此, 过表达HP14.5细胞的FGD6会使HP14.5细胞向肝细胞分化并促进细胞增殖, 而这一过程可能通过Wnt经典信号通路实现。