全反式维甲酸拮抗地塞米松抑制人气道上皮细胞16HBE凋亡

王韵婷¹胡婕¹ 邹文静¹ 丁凤霞^1,2 田代印^1,2 应林燕^1,2 代继宏^1,2 罗征秀^1,2符州^1,2 牛超^1,2*

¹重庆医科大学附属儿童医院儿童发育疾病研究教育部重点实验室, 儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地,儿科学重庆市重点实验室, 重庆 400014; ²重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心, 重庆 400014

摘要 :

该研究探讨全反式维甲酸(all-trans Retinoic Acid, ATRA)对GCs诱导人气道上皮细胞过度凋亡的拮抗作用。将人支气管上皮细胞16HBE作为研究对象, 使用10 μmol/L地塞米松(Dex)、1 μmol/L ATRA处理细胞, 体外培养16HBE细胞, 分为Dex组、ATRA组、Dex+ATRA组和Control组。采用TUNEL法检测16HBE细胞凋亡情况, Annexin V/PI双染法检测膜磷脂酰丝氨酸外翻的情况, 荧光探针JC-1检测线粒体膜电位变化, Western blot检测细胞的凋亡蛋白Caspase-3和其水解片段Cleaved-caspase-3的水平。相较于Control组, Dex组的TUNEL阳性细胞明显增多, Annexin V阳性蛋白明显上调, 线粒体膜电位明显下降, Caspase-3和Cleaved-caspase-3的水平明显增高; 联合ATRA则可以显著减轻Dex引起的细胞凋亡。因此, Dex可以导致人支气管上皮16HBE细胞的过度凋亡, 而ATRA可以削弱Dex的这种作用。