携带mK5基因的重组腺病毒联合多西他赛对LNCaP细胞的体外抗癌作用探究

胡云¹方先龙² 顾锦法^2,3 杨圆圆² 李慧² 刘新垣^1,2,3 章康健^2,3*

¹浙江理工大学生命科学与医药学院新元医学与生物技术研究所, 杭州310018; ²上海元宋生物技术有限公司, 上海 201401; ³中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所, 上海 200031

摘要 :

该文通过携带mK5基因的溶瘤腺病毒OncoAd-mK5联合多西他赛(docetaxel, DTX)处理前列腺癌细胞株LNCaP, 以探究两者联合作用的体外抗癌效果。采用CCK-8法分别检测OncoAdmK5、docetaxel以及两者联合用药对LNCaP增殖的抑制作用; 用显微镜分别观察OncoAd-mK5、多西他赛单独作用及两者联合作用引起的细胞形态学变化; 利用Hoechst 33258染色、流式细胞术检测各处理组细胞的凋亡情况; Western blot检测E1A、mK5以及凋亡相关蛋白Caspase-8、XIAP、PARP的蛋白质表达水平; 实时荧光定量PCR(Q-PCR)分析处理组细胞的血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA水平变化。结果表明: 感染复数(multiplicity of infection, MOI)=4的溶瘤腺病毒OncoAd-mK5与5 nmol/L的docetaxel能够协同抑制LNCaP的生长, 且两者联合处理组的细胞凋亡现象比单独作用的效果更明显, 这一新的药物组合为前列腺癌的临床治疗提供了参考。