Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶提高腺病毒转染移植静脉组织效率的研究

王小文^1,2* 李送¹ 钟昌明¹ 张诚^1,3 黄春¹ 冯波² 吕志前⁴

¹重庆医科大学附属第一医院胸心外科, 重庆 400016; ²香港中文大学, 生物医学研究院, 再生医学重点实验室, 香港 999077; ³伦敦大学玛丽皇后学院, 威廉哈维研究所, 伦敦 EC1M 6BQ; ⁴上海交通大学附属第六人民医院心血管外科, 上海

摘要 : 安全高效地将治疗基因导入移植静脉组织是移植静脉再狭窄基因治疗研究的重要内容, 该研究探讨应用Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶局部转染提高移植静脉的腺病毒转染效率的可行性。构建大鼠移植静脉再狭窄模型, 应用Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶涂染法, 通过增加腺病毒载体与血管组织的接触时间以及改善血管壁的渗透性, 提高移植静脉的腺病毒转染效率。分别在术后7、14、28天采集标本, 应用冰冻切片、免疫组化染色和qRT-PCR检测移植静脉中 EGFP的表达以评估转染效率。Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶局部转染能够显著提高移植静脉的腺病毒转染效率, 其中0.25%的胰蛋白酶转染效率最佳，并且不影响移植静脉血管的组织抗拉性。 Poloxamer 407-胰蛋白酶混合凝胶涂染是一种简单、安全和高效的局部基因转染方法, 可用于移植静脉再狭窄的防治研究。