睾酮通过WNK1激酶调节肾脏钾离子相关通道的研究

摘要 : 该文探讨了睾酮通过WNK1(with-no-lysine kinase 1, WNK1)激酶对肾脏钾离子相关通 道的调控从而引起血压变化的机制。构建包含正常雄鼠、去势雄鼠和去势后注射睾酮雄鼠的实验 模型, 通过检测表型, 运用实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time quantitative polymerase chain reaction detecting system, QPCR)、免疫蛋白印迹(Western blot, WB)技术检测WNK1激酶、受WNK1 介导的肾脏外髓钾通道(renal outer medullary potassium, ROMK)、大流量钙激活钾通道(largeconductance Ca2+-activated K+ channel, BK)和钠钾氯同向转运体2(Na-K-Cl cotransporter 2, NKCC2) 的mRNA与蛋白表达, 同时用免疫荧光技术验证。表型结果显示, 去势雄鼠的血钾上升, 血压下降。 去势雄鼠接受睾酮注射后, 血钾下降, 血压升高。QPCR和WB的结果显示, 去势雄鼠的WNK1相比 于正常雄鼠均升高, 同时去势雄鼠注射睾酮之后, WNK1恢复原有表达。QPCR和WB的结果还显示, 去势雄鼠ROMK降低, BK-α和NKCC2升高, 去势雄鼠接受睾酮注射后, 三种钾离子相关通道的表达 恢复正常。免疫荧光结果与QPCR和WB的结果相一致, 磷酸化WNK1的WB结果和正常雄鼠相比, 去势雄鼠磷酸化WNK1升高, 去势雄鼠接受睾酮注射后, 磷酸化WNK1降低。实验结果表明, 睾酮 引起了WNK1、p-WNK1、ROMK、BK-α和NKCC2的变化。WNK1抑制剂注射实验发现, WNK1 下游的肾脏离子通道ROMK表达升高, BK表达降低, 钠钾氯同向转运体NKCC2也降低, 表明WNK1 可以调控ROMK、BK和NKCC2引起血压变化。这些发现表明, 睾酮能通过WNK1来调控肾脏钾离 子相关通道进而影响血压。