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氰酸盐诱导氧化应激促进肾小管上皮细胞上皮–间充质转化


田宽1,2 袁德智3 胡玲1,2 张滔1,2,4 周鹏1,2 郭星娴1,2 陈益1,2 郭小宇1,2 李林颖1,2 李静1,2 冉建华1,2*
1重庆医科大学解剖教研室神经科学研究中心, 重庆 400016; 2重庆医科大学组织胚胎教研室 组织细胞工程与干细胞研究室, 重庆 400016; 3重庆医科大学第二附属医院神经内科, 重庆 400016; 4重庆三峡医药高等专科学校, 重庆 404120
摘要 : 该研究探讨氰酸盐(cyanate)诱导肾小管上皮细胞氧化应激损伤和促进肾纤维化的作 用。氰酸盐作用HK-2肾小管上皮细胞后, CCK8法检测其对细胞活力的影响; 倒置显微镜观察细 胞形态的改变; DCFH-DA法检测细胞ROS水平; 细胞免疫荧光和Western blot分别检测E-cadherin、 Fibronectin、α-SMA的表达; Western blot检测TGF-β的表达水平。结果显示, 2 mmol/L氰酸盐明显 下调HK-2细胞的活力(P<0.05), 细胞形态变为长梭形。氰酸盐作用24 h后, HK-2细胞内ROS水平 呈浓度依赖性升高。免疫荧光和Western blot结果均显示, 氰酸盐作用24 h后, HK-2的Fibronectin、 α-SMA表达升高, E-cadherin表达下降; TGF-β的表达水平随氰酸盐浓度升高而上调(P<0.05)。以上 结果表明, 氰酸盐诱导肾小管上皮细胞产生过量ROS, 上调TGF-β水平促进细胞上皮–间充质细胞 转化(epithelia-mesenchymal transition, EMT)。