可稳定表达ZsGreen1基因的正常细胞来源单核细胞株的构建

摘要 : 为探索构建可表达外源基因的正常细胞来源单核细胞株的可行方案, 该研究分别尝 试以脂质体转染法、腺病毒载体感染法和含Tet-On调控元件的慢病毒载体感染法, 构建可表达绿 色荧光蛋白的SC细胞株。经慢病毒感染和靶向扩增获得稳定表达目的基因的SC细胞后, 该研究 进而验证了该细胞可否在PMA诱导下分化为典型的巨噬细胞。研究结果显示, 脂质体转染法和腺 病毒载体感染法未能有效导入外源基因至SC细胞; 经慢病毒感染和靶向扩增, 该研究成功构建了 2株可稳定表达ZsGreen1基因的SC细胞株(SC-ZsGreen1), 其ZsGreen1阳性表达率均高于95%; SCZsGreen1 细胞与SC细胞经PMA处理后均具相似的巨噬细胞表型特征, 包括CD11b和CD14表达升 高、吞噬能力上调和趋化因子IL-8分泌水平上升。综上, 该研究报道了一种构建可稳定表达外源 基因的正常人外周血来源单核细胞株的可行方案。