靶向调控AKT/mTOR信号通路对骨肉瘤细胞MG63增殖、凋亡、自噬及成骨分化的研究

张遥1 康权2 董姿杏1 谢圣男1 罗庆1*

1重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所, 儿童发育疾病研究教育部重点实验室, 儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地, 儿科学重庆市重点实验室, 400014 重庆; 2重庆医科大学附属儿童医院肝胆外科, 400014 重庆

摘要 : 探究靶向调控AKT/mTOR信号通路后, 对人骨肉瘤细胞株(MG63)增殖、凋亡、自噬及成骨分化的影响并探讨其机制。RT-PCR检测AKT、mTOR在不同恶性程度骨肉瘤细胞中基因表达情况, 选择靶向mTOR信号通路的抑制剂雷帕霉素和激活剂3-苄基-5-(2-硝基苯氧甲基)-γ-丁内酯 (3-BDO), CCK-8检测细胞增殖, DAPI染色、Annexin V-FITC/PI双染法检测凋亡, 碱性磷酸酶(ALP) 染色检测早期成骨能力, 茜素红染色检测中晚期成骨能力, Western blot技术检测自噬相关蛋白及分化抑制因子(Id1)表达。结果显示, AKT/mTOR表达情况与骨肉瘤恶性程度有关; 通过靶向抑制 AKT/mTOR信号通路后, 可抑制骨肉瘤细胞MG63增殖, 促进凋亡, 上调自噬水平, 抑制其早、晚期成骨分化, 靶向激活AKT/mTOR信号通路后, 对骨肉瘤细胞MG63增殖、凋亡无明显影响, 下调自噬水平, 但可促进其早、晚期成骨分化。该研究表明, 靶向调控AKT/mTOR信号通路与分化抑制因子(Id1)表达有关, 可进一步阐明骨肉瘤发病机制, 为诱导分化治疗提供理论依据。