Nlrp3 siRNA对高糖培养的肾小球系膜 细胞促炎因子表达的影响及机制

该文研究了Nlrp3 siRNA对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞促炎因子表达水平的影响 及相关机制。采用合成Nlrp3 siRNA转染高糖培养的系膜细胞(高糖组)和正常培养的系膜细胞(正 常组)。运用实时荧光定量PCR和Western blot检测沉默Nlrp3后促炎因子IL-1β和TNF-α表达水平。 运用生物信息学分析和ChIP检测Nlrp3与炎症相关因子NF-κB的关系。运用Western blot检测了沉 默Nlrp3后NF-κB的表达情况以及特异性抑制NF-κB后对Nlrp3的影响。结果表明, Nlrp3表达水平在 高糖培养的系膜细胞中较正常组增高, 将筛选出的沉默效应最优Nlrp3 siRNA转染入高糖培养的系 膜细胞后, 促炎因子IL-1β和TNF-α表达降低。进一步生物信息学分析和ChIP实验结果显示, Nlrp3 启动子区域与NF-κB亚单位p50具有靶向结合关系, 同时, Western blot结果显示, 在高糖系膜细胞中 沉默Nlrp3后NF-κB p50表达减少, 特异性抑制p50后Nlrp3同步降低, 提示NF-κB是Nlrp3影响系膜细胞炎症因子表达的重要因素。因此, Nlrp3可能是调控高糖系膜细胞炎症反应的一个重要新因子, 其机制可能是Nlrp3启动子与NF-κB结合, 活化NF-κB, 从而影响促炎因子表达。在糖尿病肾病中靶向调控Nlrp3可能为预防和治疗疾病提供一个新的方向。