长链非编码RNA 1500026H17Rik 对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响

为了探讨长链非编码 RNA 1500026H17Rik对小鼠肾小球系膜细胞增殖的影响, 采用 qRT-PCR(quantitative Real-time PCR)检测1500026H17Rik在糖尿病肾病小鼠肾脏组织及在高糖和低糖条件下培养的肾小球系膜细胞中的表达水平; 扩增小鼠 1500026H17Rik的全长序列, 将其克隆到 pcDNA3.1(+)载体上, 构建pcDNA3.1(+)-1500026H17Rik过表达质粒, 并设计合成siRNA; 将 1500026H17Rik-siRNA和 pcDNA(+)-1500026H17Rik过表达质粒分别转染至高糖或低糖培养的肾小球系膜细胞中, 通过5-乙基-2′-脱氧尿嘧啶核苷(5-ethyny1-2′-doexyuridine, EdU)检测系膜细胞的增殖能力。结果表明, 在糖尿病肾病小鼠肾脏组织和高糖培养的系膜细胞中1500026H17Rik水平表达显著为高。在低糖培养的系膜细胞中转染pcDNA3.1(+)-1500026H17Rik过表达质粒后与低糖培养的系膜细胞或空质粒转染对照组相比, 低糖1500026H17Rik过表达的肾小球系膜细胞的增殖能力明显提高。同时, 将通过qRT-PCR筛选出的一条敲低效率最佳的1500026H17Rik-siRNA转染至高糖培养的系膜细胞中后, 与高糖培养的系膜细胞或siRNA转染对照组相比, 1500026H17Rik敲低的肾小球系膜细胞的增殖能力明显减弱。lncRNA-1500026H17Rik在糖尿病肾病小鼠肾脏组织中呈高表达, 且影响高低糖培养的肾小球系膜增殖, 提示1500026H17Rik可能参与了糖尿病肾病的发生。