体外诱导人脐带间充质干细胞向II型肺泡上皮细胞分化
刘 姜1 彭单伊1 苟 好1 吴 羡1 司道祝1 牛 超2 田代印2 刘恩梅2 邹 琳3 符 州1,2*
1重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所, 儿童发育疾病研究教育部重点实验室, 儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地, 重庆市干细胞治疗工程技术研究中心, 重庆 400014; 2重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心, 重庆 400014;3重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心, 重庆 4000
摘要 : 该研究旨在通过条件培养基诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells, hUC-MSCs)向II型肺泡上皮细胞(type II alveolar epithelial cells,AEC2s)分化,为后续研究hUC-MSCs来源的AEC2s在肺部疾病中的治疗作用奠定基础。hUC-MSCs分为实验组和对照组, 实验组用小气道上皮细胞生长基础培养基培养2天后添加生长因子诱导培养, 对照组用20%血清的DMEM/F12培养。第14天观察细胞形态; Western blot、免疫荧光、流式细胞术和ELISA法检测肺泡表面活性蛋白C(surfactant protein C, SP-C)及前肺泡表面活性蛋白C(pro-surfactant protein C, proSP-C)。利用透射电镜观察板层小体。结果显示, 实验组细胞形态由长梭形向多边形转变, 细胞内有proSP-C表达, 培养基上清中有SP-C分泌,透射电镜观察到板层小体; 而对照组细胞形态无明显改变, 未检测到proSP-C表达、SP-C分泌和板层小体形成。该研究结果表明, 体外诱导培养可促进hUC-MSCs向AEC2s分化, 通过该方法有望大量获得hUC-MSCs来源的AEC2s用于肺部疾病治疗研究。
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