全反式维甲酸促进骨形态发生蛋白9诱导肝祖细胞成熟分化的作用研究

龚梦嘉¹ 惠慧¹ 崔洁洁¹ 毕杨¹ 何昀^1,2*

¹重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所干细胞实验室, 儿童发育疾病研究教育部重点实验室,儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地, 儿科学重庆市重点实验室, 重庆 400014;²重庆医科大学附属儿童医院胃肠新生儿外科, 重庆 400014

摘要 : 该文研究了全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)促进骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9, BMP9)诱导肝祖细胞14-19(hepatic progenitor cell 14-19, HP14-19)成熟分化的作用。重组腺病毒Ad-BMP9和ATRA单独及联合作用诱导肝祖细胞HP14-19成熟分化, 荧光素酶报告基因检测ALB-Gluc表达情况, Real-time PCR检测肝脏相关基因DLK、AFP、ALB和TAT的mRNA水平, Western blot及免疫荧光检测AFP、ALB、CK18和UGT1A蛋白质水平, PAS染色和ICG摄取实验检测成熟分化后的功能。Ad-BMP9组和ATRA组的ALB-Gluc活性较对照组增高, 而Ad-BMP9+ATRA组ALB-Gluc活性又显著高于Ad-BMP9组和ATRA组。Ad-BMP9+ATRA组的ALB和TAT mRNA水平以及ALB、CK18和UGT1A蛋白质水平均高于Ad-BMP9组和ATRA组, 但肝干细胞标志DLK、AFP的表达均降低(P<0.05)。Ad-BMP9+ATRA组的ICG摄取及PAS染色阳性细胞数显著高于Ad-BMP9组和ATRA组。ATRA和Ad-BMP9均诱导肝祖细胞HP14-19成熟分化, 联合作用强
于单独作用。