miR-638抑制尤文肉瘤细胞的增殖和血管拟态形成的影响

摘要 : 该研究旨在探讨miR-638在尤文肉瘤细胞中的表达及其对尤文肉瘤细胞增殖和血
    管拟态形成能力的影响, 进一步探讨其可能机制。应用qRT-PCR检测miR-638在尤文肉瘤细胞系
    (A673、SK-ES-1和RD-ES)中的表达; 转染人工合成miR-638 mimic到RD-ES和SK-ES-1细胞内, 运
    用CCK-8法和小管形成实验分别检测miR-638对A673和SK-ES-1细胞增殖及血管拟态形成能力
    的影响; 应用qRT-PCR和Western blot探讨对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,
    VEGFA)在A673细胞内是否为miR-638的靶基因, 回复实验验证VEGFA是否参与miR-638对A673细胞增殖和血管拟态形成的作用。结果表明, 与人间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC)相比, 尤文肉瘤细胞内miR-638呈低表达趋势(P<0.05); 转染miR-638 mimic后, RD-ES及SK-ES-1细胞内miR-638升高明显, 表明miR-638 mimic转染成功; 转染miR-638组尤文肉瘤细胞增殖能力下降(P<0.05), 新生拟态血管分支数较对照组减少(P<0.05); 转染miR-638组A673和SK-ES-1细胞内VEGFA mRNA及蛋白质水平均明显下降, 提示miR-638能够调控尤文肉瘤细胞内VEGFA的表达;回复实验结果显示, 同时转染了miR-638 mimic和pcDNA-empty组细胞内VEGFA的蛋白质水平最低, 生长速度最慢, 小管形成的分支数最少。miR-638在尤文肉瘤细胞中呈低表达, 过表达miR-638能够抑制尤文肉瘤细胞增殖及血管拟态形成, 该作用可能通过靶向调控VEGFA作用而实现的。