氰酸盐诱导人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤

樊春华¹　田宽^1,2　何菲¹ 胡玲^1,2　郭珮^1,2　陈益^1,2　熊伟^1,2 周宏宇¹ 李静^1,2　李晋芳³　冉建华^1*

¹重庆医科大学解剖教研室神经科学研究中心, 重庆 400016; ²重庆医科大学组胚教研室组织细胞工程与干细胞研究室, 重庆 400016; ³重庆医科大学第二附属医院神经内科, 重庆 400016

摘要 : 该研究探讨尿素水解产物氰酸盐(cyanate)对体外培养的血管内皮细胞氧化应激和功能障碍的作用。培养人脐静脉内皮细胞系(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs), 通过CCK8法检测氰酸盐对内皮细胞活力的影响; 采用DCFH-DA法检测ROS水平; 用比色法测定NO水平; 分别用细胞免疫荧光和Western blot检测ICAM-1(intercelluar adhesion molecule-1)、eNOS(endothelial nitric oxide synthase)表达。氰酸盐呈浓度依赖性影响内皮细胞活力, 与对照组相比, 当氰酸盐浓度为1.00 mmol/L时, 细胞活力受到明显抑制(P<0.05); 与正常组和阴性对照组(甘露醇组)相比, 氰酸盐诱导内皮细胞内ROS水平明显升高; NO水平明显减少(P<0.05)。免疫荧光结果显示,氰酸盐作用内皮细胞24 h后, ICAM-1荧光明显增强, eNOS明显减弱(P<0.05)。Western blot结果显示,内皮细胞内ICAM-1水平随氰酸盐浓度升高和负荷时间延长上调, 而eNOS水平下调(P<0.05)。氰酸盐诱导血管内皮细胞氧化应激产生和功能障碍。