靶向Wnt/β-catenin通路的溶瘤腺病毒携带抑癌基因TSLC1抑制肿瘤细胞增殖的研究
金 槿 赵雨佳 章 健 王彬蓉 王毅刚*
浙江理工大学生命科学学院, 杭州 310018
摘要 : 溶瘤病毒(oncolytic viruses)可选择性地感染肿瘤细胞并在其中复制, 使宿主细胞裂解并在体内产生强烈的免疫应答反应, 从而抑制或者杀死肿瘤细胞。因其特有的溶瘤性和靶向性,溶瘤病毒成为肿瘤基因治疗的热门领域之一。基于Wnt信号的肿瘤特异性, 本研究使用Wnt信号启动子TCF/LEF结合位点序列, 调控腺病毒早期基因E1A, 并删除E1A基因序列上能与Rb蛋白结合的24 bp片段。将抑癌基因TSLC1插入腺病毒的E3区, 形成重组腺病毒Ad.wnt-E1A(Δ24)-TSLC1。通过双荧光素酶报告系统、Western blot实验、MTT法、结晶紫染色法、Hoechst染色实验分别检测Wnt信号活性、肿瘤细胞的存活率和凋亡的变化情况。结果发现, 肿瘤细胞较正常肝细胞具有较高的Wnt通路活性和病毒敏感性, 其中重组病毒处理HepG2后杀伤效果显著, 并可通过Caspase通路诱导细胞凋亡, 为肝癌的临床治疗提供参考。
中文版
英文版