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敲低LDHA抑制脑胶质瘤细胞生长和EMT的研究


彭光泉 韩 秀 陈 曦 唐 宇 程 洁 熊二梦 彭琬昕 龚爱华*
江苏大学医学院基础医学系, 镇江 212013
摘要 : 该研究旨在探讨乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A, LDHA)基因对脑胶质瘤细胞上皮细胞–间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)以及细胞生长的影响。用sh-LDHA质粒转染脑胶质瘤细胞, 比色法检测细胞内LDHA活性, 流式细胞术检测细胞凋亡率, CCK-8法和克隆形成实验分析细胞增殖能力, 划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力, q-PCR检测LDHA mRNA水平, 以及Western blot检测LDHA和EMT相关蛋白质水平。结果表明, 转染sh-LDHA质粒能显著降低LDHA mRNA和蛋白质水平。同时, 敲低LDHA诱导U87MG细胞发生凋亡, LDHA活性降至原来水平的50% U87MG细胞的增殖和迁移能力低于sh-EGFP组(P<0.05)。另外, 敲低LDHA抑制U87MG细胞的EMT过程。而在LDHA表达水平相对较低的U251MG和SW1783细胞中, 干扰LDHA对细胞生长和EMT没有显著影响。该研究结果说明, LDHA在脑胶质瘤细胞的EMT过程和生长中发挥了重要作用。