甜蜜素联合柠檬黄对Caco-2细胞毒性机理的初步探究

摘要 : 该文探讨甜蜜素联合柠檬黄对人克隆结肠腺癌细胞(Caco-2细胞)损伤的机理, 以高内涵细胞成像分析(high content analysis, HCA)技术为平台, 析因设计实验方差分析为联合毒性的评价方法、实时荧光定量PCR(quantificational Real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)和Western blot为检测方法对此进行探究。结果表明, 甜蜜素与柠檬黄均会显著地抑制Caco-2细胞的增殖, 且呈现剂量–效应关系, IC50分别为11.37±0.15 g/L和1.21±0.12 g/L。与单独组相比, 联合组显著地升高细胞内Ca2+浓度、升高活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平、抑制细胞增殖、增大细胞膜通透性、降低线粒体膜电位。联合组在细胞内Ca2+浓度、ROS水平上表现为协同作用, 在线粒体膜电位变化上表现为相加作用。qRT-PCR和Western blot显示, 联合组显著提高Bax、细胞色素c(cytochrome c)、胱冬肽酶-3(caspase-3)等基因的表达, 并上调Bax和下调Bcl-2的蛋白质水平, 同时提高细胞色素c、剪切胱冬肽酶-3(cleaved-caspase-3)的蛋白质水平来抑制Caco-2细胞增殖。