bFGF激活PI3K信号通路调控大鼠胚胎干细胞自我更新

摘要 : 碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)在小鼠和人胚胎干细胞自我更新和分化过程中起着重要的调控作用, 但目前关于bFGF在大鼠胚胎干细胞中的调控作用并不是很清楚。该文在无饲养层细胞的条件下, 通过碱性磷酸酶染色、免疫荧光、RT-PCR等方法对大鼠胚胎干细胞在激活bFGF相关信号通路后自我更新、细胞分化潜能等进行了分析。结果显示, 在白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)加GSK3抑制剂(CHIR99021)和ERK抑制剂(PD0325901)(简称L/2I)基础上, bFGF能明显促进大鼠胚胎干细胞的增殖。L/2I/b(L/2I+bFGF)条件下培养的大鼠胚胎干细胞能维持干性标志基因Oct-4、Nanog的表达, 同时也保持了向不同胚层细胞分化的能力。另外, L/2I/b也能支持从大鼠囊胚原代分离胚胎干细胞。Western blot结果显示, bFGF能促进PI3K下游分子AKT的磷酸化。小分子化合物SU5402或LY294002分别抑制FGF受体及PI3K均能阻断bFGF激活的AKT磷酸化, 并抑制bFGF对大鼠胚胎干细胞自我更新的促进作用。这些结果表明, bFGF通过激活大鼠胚胎干细胞PI3K/AKT相关的信号通路促进大鼠胚胎干细胞自我更新。