TGF-β1信号在成纤维细胞促血管生成中作用的研究

摘要 : 该研究旨在探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)信号在成纤维细胞促血管生成中的作用。实验通过ELISA检测了Hepa1-6细胞上清液中TGF-β1的含量。将胎鼠成纤维细胞分三组, 分别用普通培养液(DMEM/F12组)、含Hepa1-6细胞上清液的条件培养液(Hepa1-6组)以及加入1 μmol/L TGF-β1受体抑制剂(GW788388)的条件培养液(GWHepa1-6组)培养。采用免疫荧光双染法、qPCR检测培养的成纤维细胞中α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A , VEGFA)的蛋白质及mRNA表达水平。采用基质胶(Matrigel)血管形成实验检测成纤维细胞上清液作用下EA.hy 926细胞的血管形成能力。ELISA结果显示, 与DMEM/F12相比, Hepa1-6细胞上清液中TGF-β1表达量明显升高(P<0.01)。免疫荧光双染法和qPCR结果显示, 与DMEM/F12组和GWHepa1-6组比较,Hepa1-6组成纤维细胞中α-SMA和VEGFA蛋白质及mRNA相对水平明显增加(P<0.01), 且在第5 d时达最高, 其上清液诱导EA.hy 926细胞的血管形成能力明显增强(P<0.01)。该研究表明, TGF-β1信号通路可以诱导成纤维细胞α-SMA和VEGFA的表达, 进而促进EA.hy 926细胞形成小管样结构。