基于TAXIScan细胞动态可视化系统分析中性粒细胞迁移以及瞬时钙离子流的变化

摘要 : 采用新型TAXIScan细胞动态可视化系统观察和分析中性粒细胞在趋化因子甲酰甲硫氨酰–亮氨酰–苯丙氨酰(N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine, fMLP)诱导下的迁移以及在此过程中胞质内游离钙离子浓度的变化规律。该文将小鼠骨髓中性粒细胞经Fluo-3/AM标记后用流式细胞术检测不同浓度fMLP刺激下瞬时钙离子流的变化。采用TAXIScan系统观测fMLP趋化下细胞的运动及运动过程中胞质内钙离子浓度的变化。流式细胞术结果显示, 细胞在0.5、1、5 μmol/L fMLP诱导下形成的瞬时钙离子流峰值最高; TAXIScan结果显示, fMLP作用下细胞瞬时钙离子流要早于极性化出现, 且在细胞迁移过程中伴随着钙离子浓度的振荡波动, 其中1 μmol/LfMLP作用下细胞运动速度最快、路程最远。TAXIScan系统可准确、定量地分析中性粒细胞定向迁移过程及单细胞钙离子荧光的变化, 为探究中性粒细胞极性与钙离子间的关系提供新方法及参考依据。