SIRT6基因沉默对人肝癌细胞凋亡的影响及其机制研究

摘要 : 该文旨在探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子6(silent information regulator 6, SIRT6)基因沉默对人肝癌细胞凋亡的影响及其机制。逆转录PCR(RT-PCR)和Western blot分别检测人肝癌细胞系(SK-Hep-1、Huh-7、PLC/PRF/5、HepG2)和永生化肝细胞系(MIHA)中SIRT6基因的表达水平; 利用慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT6的表达, 并通过RT-PCR和Western blot验证其沉默效率; 流式细胞术检测SIRT6基因沉默对人肝癌细胞凋亡的影响, 进一步应用RT-PCR和Westernblot检测SIRT6基因沉默对凋亡抑制蛋白基因(inhibitor of apoptosis proteins, IAPs)家族mRNA和蛋白质水平的影响; 最后, 应用流式细胞术分析X连锁凋亡抑制蛋白基因(X-linked inhibitor of apoptosisprotein gene, XIAP)在SIRT6基因沉默诱导的肝癌细胞凋亡中的作用。结果显示, SIRT6基因在人肝癌细胞系中表达上调; 慢病毒介导的shRNA能抑制人肝癌细胞中SIRT6基因的表达; 沉默SIRT6基因的表达能诱导人肝癌细胞凋亡, 并降低XIAP的mRNA和蛋白质水平; 过表达XIAP能逆转SIRT6基因沉默所诱导的人肝癌细胞凋亡。该研究结果提示, SIRT6基因沉默可能通过调节XIAP的表达从而诱导人肝癌细胞凋亡。