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大鼠脑微血管内皮细胞培养及其药物转运体 Oatp2和P-gp的表达


郭 艺 蒋 莉* 刘官信 陈恒胜
重庆医科大学附属儿童医院神经内科, 重庆400014
摘要 : 贴块法培养脑微血管内皮细胞(BMECs), 倒置显微镜动态观察细胞生长及形态, Ⅷ因子相关抗原、CD34免疫细胞化学联合鉴定细胞并确定纯度。免疫细胞化学和Western印迹法检测药物转运体有机阴离子转运多肽亚型2(Oatp2)及P-糖蛋白(P-gp)在培养内皮细胞上的表达。结果显示, 获得的BMECs呈多角形或铺路石形, 单层贴壁生长; 培养细胞Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学、CD34免疫荧光染色均为阳性, 细胞纯度90%; 培养细胞有Oatp2及P-gp表达, 且二者均主要表达于BMECs细胞膜。提示贴块法可获得原代培养BMECs, 方法简便易行, 细胞纯度较高。原代培养的BMECs上有药物转运体Oatp2及P-gp的表达, 为血脑屏障上药物转运体的体外研究提供了可能途径。
    


CSTR: 32200.14.cjcb.2007.04.0021