体外培养传代人脂肪、脐带、胎盘间充质干细胞的遗传特性比较研究

刘宇¹ 马明¹ 侯俊² 高雪华² 陈思翔¹ 刘月¹ 邓银¹ 郑东明¹ 田奕¹ 张蓉^3* 陈静娴^2*

¹成都中创清科医学检验所有限公司, 成都 610094; ²成都清科生物科技有限公司, 成都 610094;³四川大学基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室, 成都 610041

摘要 : 该文利用无血清培养基对脐带间充质干细胞(umbilical cord derived mesenchymal stem cells, UC-MSCs)、脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells, AD-MSCs)和胎盘间充质干细胞(placenta derived mesenchymal stem cells, PMSCs)进行了体外传代培养, 通过比较此三种不同来源间充质干细胞生物学特性及遗传特性在传代过程中的变化及差异, 为间充质干细胞临床应用安全性及细胞来源的选择提供实验和理论依据。通过细胞形态观察、细胞周期检测、表面标记物检测、染色体核型分析、相关基因表达及细胞因子的定量分析, 结果发现, UC-MSCs和ADMSCs在体外培养时呈长梭形旋涡状贴壁生长, 而PMSCs则呈短梭形旋涡状或网状贴壁生长, 细胞核较大。通过长期传代培养及细胞周期分析发现, PMSCs增殖活性最强, UC-MSCs次之, AD-MSCs最弱。三种细胞均表达CD73、CD90和CD105, 且阳性率大于98%; 均低表达CD11b、CD19、CD34和CD45, 且阳性率低于1%; HLA-DR均为阴性。三种细胞染色体核型稳定, 没有缺失、易位和倒位等现象。7种基因表达均有差异, 但在7代内各基因表达量仅有微小变化, 细胞因子在传代过程中均比较稳定。以上结果提示, 利用无血清培养基体外传代培养至7代以内, PMSCs比AD-MSCs和UCMSCs更安全。