AS-mCLB1重组质粒体外抗肿瘤及化疗增敏作用
张 伶1,2 魏于全2 宋 英1 蒋 磊1 陈 平2 陈县城2 李继承1*
浙江大学细胞生物学研究所，杭州 310058; 2四川大学华西医院肿瘤生物治疗国家重点实验室，成都 610041
摘要 : 研究反义全长小鼠细胞周期蛋白B1重组质粒(pAS-mCLB1)体外抗肿瘤及化疗增敏作用。扩增后少量抽提并纯化pAS-mCLB1， 通过脂质体将其转染入小鼠露易丝肺癌(LL/2)细胞， RT-PCR和Western印迹测定细胞内细胞周期蛋白B1的表达， 观察转染后细胞形态变化， MTT法检测细胞增殖活性， 流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。细胞转染48 h后， 用化疗药物健择(gemcitabine; 0.2 μmol/L)处理24 h， MTT法测定健择对细胞的杀伤作用。研究提示pAS-mCLB1转染后LL/2细胞形态明显异常， 细胞内细胞周期蛋白B1表达显著下调， 细胞周期阻滞于G1期， 增殖受抑，凋亡增加; 健择对pAS-mCLB1转染后LL/2细胞的杀伤作用显著增强。重组质粒pAS-mCLB1体外具有明显的抗肿瘤作用， 并能增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性， 估计上述作用与其下调肿瘤细胞内细胞周期蛋白B1表达， 从而诱导细胞周期阻滞及凋亡等作用相关。
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