高糖预处理内皮细胞条件培养基对脐带间充质干细胞增殖和凋亡的影响

摘要 : 为了探讨体外高糖诱发内皮细胞损伤而继发性对人脐带间充质干细胞(humanumbilical cord-derived mesenchymal stem cell, hUC-MSC)增殖和凋亡的影响及其机制, 该研究采用酶消化法分离培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell, hUVEC), 制备不同糖浓度(5, 30 mmol/L)培养hUVECs 24, 48, 72 h条件培养基(conditioned medium, CM); 内皮细胞条件培养基(hUVEC-CM)培养hUC-MSC 3 d, 实时细胞监测系统检测hUC-MSC的增殖; Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞的凋亡情况; Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Cl-Caspase3的表达。结果显示, 条件培养基培养hUC-MSC 3 d后, 与对照组相比, hUVEC-CM(HG)组hUC-MSC的增殖活力明显降低, 凋亡率显著升高, 凋亡相关蛋白Bcl-2的表达明显减少, Bax及Cl-Caspase3的表达明显增加(P<0.05)。以上表明, hUVEC-CM(HG)能抑制hUC-MSC的增殖, 并通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cl-Caspase3的表达诱导hUC-MSC凋亡。