肝癌细胞中骨桥蛋白基因表达调控的分子机制研究

摘要 : 骨桥蛋白(osteopontin, OPN)是人体内一种重要的分泌蛋白, 在细胞黏附、迁移、机体免疫等作用中发挥重要的生理功能。近年来的研究发现, OPN在恶性肿瘤组织中参与诱导细胞外基质的降解及重构, 对肿瘤细胞的侵袭能力有重要调控作用。此外, OPN在肝癌及其他多种肿瘤类型中表达均显著上调, 但调控机制尚未完全阐明。该研究从肝癌细胞株中克隆了OPN基因SPP1的启动子序列pSPP1, 尝试鉴定肝癌中SPP1的主要调控机制。截断突变体及点突变体分析发现, 完整的区域(–24~–17)是pSPP1转录活性所必需的, 外源表达AP-1转录因子的c-jun亚基, 能够显著提高这一区域的转录活性, 然而, c-fos没有这种作用效果。凝胶迁移实验进一步证明AP-1转录因子与pSPP1的直接相互作用。利用实时定量PCR和Western blot还发现, 外源表达c-jun能够显著提高内源性OPN的表达水平。以上实验结果揭示, AP-1转录因子介导的转录调控很可能是肝癌细胞OPN表达调控的关键机制, 这一研究发现有望为肝癌诊断及治疗提供新的思路。