利用FM4-64 FX标记大鼠血管平滑肌细胞的囊泡运输

姜隽^1* 王勇² 李涛³ 聂利霞¹

¹四川医科大学附属第一医院血管外科, 泸州 646000; ²叙永县人民医院外三科, 泸州 646000; ³四川医科大学心血管医学研究所, 泸州 646000

摘要 : 囊泡运输是大分子物质进入细胞的途径, 血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)与外界存在频繁的信息和物质交换, 该研究通过标识内吞囊泡来研究VSMCs的囊泡运输。体外培养大鼠胸主动脉VSMCs, 用血管紧张素II(angiotensin II, Ang II)刺激, 加入 FM4-64 FX短暂孵育后固定。通过免疫组化方法标记VSMCs血管紧张素II 1型受体(angiotensin II receptor type 1, AT1R), 检测内吞囊泡和AR1R转运之间的关系。受到Ang II的激活后, VSMC快速形成内吞囊泡, 将AT1R转运至胞质; 存在血管紧张素受体阻断剂(angiotensin receptor blocker, ARB)时, 内吞囊泡数量少, AT1R较少进入胞质。通过FM4-64 FX对胞内囊泡进行标识可以显示VSMCs的大分子物质运输, 可观察特定的分子在内吞囊泡上的分布和运输情况。