CX3CL1介导人脐静脉内皮细胞骨架改变的功能研究

摘要 : 该研究探讨了趋化因子CX3CL1对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)骨架的影响及其作用机制。CX3CL1刺激HUVECs后, 采用免疫荧光染色技术检测细胞骨架蛋白纤维状肌动蛋白(F-actin)的分布和形态改变, 采用Western blot技术检测胞质内F-actin和磷酸化促分裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases, MAPKs)的三种亚型[p38、细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase 1/2, ERK1/2)和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)]的表达水平。结果显示, 10 nmol/L CX3CL1刺激HUVECs 30 min后, 细胞的致密外周带逐渐被破坏, 胞质内有应力纤维形成; 120 min后, 外周带消失, 胞质内有大量的致密应力纤维形成; 180 min后, 胞质内应力纤维减少, 少数细胞可见致密外周带。10 nmol/L CX3CL1刺激HUVECs 30 min后, F-actin的表达水平逐渐升高, 并于120 min后达峰值; 10 nmol/L CX3CL1刺激HUVECs 1 min后, 磷酸化p38、ERK1/2和JNK表达水平升高, 5 min后三者的表达水平达峰值; 5 μg/mL抗CX3CR1抗体抑制10 nmol/L CX3CL1刺激HUVECs后, 磷酸化p38、ERK1/2和JNK的表达水平降低; 30 μmol/L p38的特异性抑制剂SB203580和ERK1/2的特异性抑制剂PD98059抑制10 nmol/L CX3CL1刺激HUVECs后, 胞质内应力纤维减少, 应力纤维变短, F-actin的表达水平降低。以上研究结果表明, CX3CL1能通过p38和ERK1/2信号通路以时间依赖方式介导HUVECs细胞骨架的重构。

CSTR: 32200.14.cjcb.2015.06.0009