C/EBP β对APP基因的表达调控作用的研究

柴娟¹ 李永玲² 芦晓红² 张茜² 马琳¹ Huichen Wang³ 孙涛¹ 崔建奇^1,2*

¹宁夏颅脑疾病重点实验室, 省部共建国家重点实验室培育基地, 银川 750004; ²宁夏医科大学基础医学院, 银川 750004; ³美国艾莫里大学Winship肿瘤研究所, 放射肿瘤学研究室, 亚特兰大 30322, 美国

摘要 : 该研究成功地构建了C/EBP β过表达慢病毒载体, 在体外人胚肾细胞(HEK293FT)进行病毒包装并感染小鼠海马神经元细胞(HT22)。通过荧光素酶报告基因实验(luciferase assay)检测C/EBP β对淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein, APP)启动子活性的影响; 通过实时荧光定量PCR(Q-PCR)来检测C/EBP β对APP和Sp1在转录水平上的表达; 通过蛋白免疫印迹分析(Western blot assay)检测C/EBP β对APP和Sp1蛋白表达的作用。萤火虫荧光素酶分析结果显示, C/EBP β对APP启动子的表达有正调控作用; Western blot和Q-PCR分析的结果表明, C/EBP β对APP和Sp1基因的表达有正调控作用。C/EBP β对APP基因表达的调控作用的机制可能在于C/EBP β 上调了内源性转录因子Sp1的基因表达, 而Sp1基因表达的增强直接导致了APP基因表达的上调。