中和性VEGF单抗的制备及其对肺癌的抑制作用

张利红¹ 刘祥磊¹ 谷银芳² 孙蕴淳² 陈旭东³ 蔡茂怀³ 张发民⁴ 林峰^2* 吴炯^1,2*

¹浙江理工大学生命科学学院, 新元医药与生物技术研究所, 杭州 310018; ²理查罗伯茨生物科技研究院, 宜兴 214200; ³盐城市第二人民医院, 盐城 224003; ⁴武汉华世通生物医药科技有限公司, 武汉 430074

摘要 : 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)可诱导血管生成, 对肿瘤的生长和转移至关重要。目前, VEGF已成为新药研发的主要靶标, 这类新药可通过阻断微血管的形成和生长达到抑制肿瘤细胞的生长或是维持肿瘤处于休眠期的目的。该研究制备了中和性VEGF单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)并探讨其对肺癌裸鼠模型血管生成的抑制作用。利用可编码VEGF全长蛋白的重组质粒免疫Balb/c小鼠, 获得中和性VEGF McAb, 并利用VEGF±VEGF McAb诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HuVEC)。通过Western blot法检测VEGFR-2磷酸化水平(活化状态), 进而测定VEGF McAb的中和性。VEGF McAb可以抑制VEGF对VEGFR-2酪氨酸磷酸化的激活作用。该研究将A549肺癌细胞接种于裸鼠构建肿瘤模型, 探讨了VEGF McAb抗血管生成的效果。结果表明, 50 μg VEGF McAb治疗组动物模型的瘤重抑制率为51.5%, 瘤体抑制率为62.5%。VEGF McAb不仅可以抑制VEGF对人脐静脉内皮细胞VEGFR-2介导的信号转导作用, 且可有效抑制小鼠肺癌模型中肿瘤的生长。